 |
Диагностика болезней свиней
с использованием методов иммуноферментного анализа
Верховский О. А.
доктор биологических наук |
 |
Непоклонова И. В.
кандидат ветеринарных наук |
НПО НАРВАК, Институт вирусологии им. Д.И.Ивановского,
Городской научно-методический центр по диагностике и профилактике
болезней человека и животных, г. Москва
 Теоретические
и практические достижения современной науки значительно расширили
арсенал методов диагностики инфекционных и инвазионных болезней
свиней.
Несмотря на то, что традиционные иммунологические методы попрежнему
широко используются в ветеринарной практике метод иммуноферментного
анализа (ИФА) занял ведущее место при проведении рутинных исследований.
Это обусловлено, во-первых, преимуществами ИФА как метода и, во-вторых,
появлением на рынке коммерчески доступных диагностических ИФА-наборов.
В настоящее время ИФА, как основной метод диагностики, широко
применяется в ряде Национальных программ борьбы с инфекционными
болезнями животных во многих странах Западной Европы и Америки.
ИФА, в основе которого лежит высокоспецифическое взаимодействие
антител с антигенами, широко используется для развития и совершенствования
двух основных направлений современной лабораторной диагностики.
К ним относятся методы, направленные на выявление антигена и методы,
направленные на определение антител (табл.1).
Таблица 1.
Применение ИФА в клинической практике
| Методы,
предназначенные для обнаружения антигена |
Методы,
предназначенные для выявления антител |
- Ранняя диагностика вирусных инфекций
- Этиологический анализ эпизоотии и изучение закономерности
эпизоотического процесса
- Количественная оценка вирусных антигенов при изготовлении
вакцинных и диагностических препаратов
|
- Эпизоотологический мониторинг инфекций
- Ретроспективная диагностика болезни
- Оценка напряженности иммунитета и иммунологической
эффективности применяемых в хозяйстве вакцин
- Определение уровня колостральных антител у молодняка
в первые дни (недели) жизни
- Оценка качества терапевтических препаратов
- Изучение механизмов формирования иммунитета и роли различных
факторов иммунной системы в патогенезе инфекционных болезней
|
Нашими специалистами в сотрудничестве с ведущими отечественными
и зарубежными учеными проводятся исследования направленные на
разработку и внедрение в широкую ветеринарную практику иммуноферментных
тест-систем, предназначенных для иммунодиагностики этиологически
и экономически значимых инфекционных болезней различных видов
животных, в том числе свиней.
В настоящее время ряд коммерчески доступных ИФА-наборов для свиноводства
выпускается на регулярной основе (табл.2.).
Таблица 2.
ИФА-наборы, применяемые в свиноводстве в настоящее время
| Возбудитель/ ™ набора |
Метод определения |
Назначение метода |
Исследуемый биологический материал |
Вирус КЧС
(КЧС-Серотест)
|
Конкурентный ИФА |
Обнаружение вирус-специфических антител |
Сыворотка крови |
Вирус РРСС
(РРСС-Серотест)
|
Непрямой ИФА |
Обнаружение вирус-специфических антител |
Сыворотка крови |
Вирус ТГС
Ротавирус
|
«Сэндвич» ИФА |
Обнаружение вирусного антигена |
Пробы фекалий |
Все ИФА-наборы прошли широкомасштабные испытания в различных
свиноводческих хозяйствах и регионах нашей страны. Наборы укомплектованы
готовыми к применению стандартизированными реагентами, достаточно
просты в применении и доступны для всех региональных ветеринарных
лабораторий.
Основные технологические приемы, используемые при разработке
тест-систем и производстве ИФА-наборов, значительно повышающие их эффективность:
- Использование моноклональных антител
- Использование рекомбинантных антигенов
- Использование высокочувствительной ферментативной метки и
очищенного конъюгата
- Использование стандартизованных микропанелей и химических
реагентов, включая субстрат
Основные характеристики наших тест-систем и ИФА-наборов:
- Специфичность
- Чувствительность
- Воспроизводимость результатов
- Минимальное время проведения анализа
- Возможность автоматизированной обработки результатов и создания
баз данных
- Комплектация наборов стандартизованными и готовыми к применению
компонентами
- Длительный срок годности наборов (при соблюдении условий хранения)
- Простота применения, автоматизированный учет и интерпретация результатов
существенно расширяет возможности для распространения и использования
данных ИФА наборов в процессе проведения как массовых, так и единичных
диагностических исследовани
В настоящее время в нашем отделе разрабатывается несколько диагностических
иммуноферментных тест-систем, предназначенных для выявления антител
к ряду возбудителей вирусных заболеваний свиней.
Новые ИФА-разработки НПО НАРВАК с использованием рекомбинантных
антигенов и/или моноклональных антител
В стадии
утверждения нормативной документации
 ИФА-набор для
выявления антител к цирковирусу свиней второго типа (Цир-ко-Серотест)
В завершающей
стадии лабораторных испытаний
ИФА для выявления
антител к вирусу ТГС
В стадии разработки
ИФА для выявления
антител к парвовирусу свиней
ИФА для выявления
антител к gE-антигену вируса болезни Ауески
Предложения НПО НАРВАК свиноводческим хозяйствам
и ветеринарным лабораториям в области иммуноферментной диагностики:
- Поставка готовых ИФА-наборов.
- Проведение комплексных исследований сывороток крови по определению
антител к вирусам КЧС, РРСС, ЦВС-2, ТГС и парвовирусу свиней.
Обследование животных на наличие антигенов ВТГС и РВС. (Во всех
случаях при необходимости проводятся дополнительные исследования
методом ПЦР и традиционными диагностическими метода-ми).
- Обучение специалистов ветеринарных лабораторий методам ИФА.
- Консультационные услуги.
- Помощь в оснащении лабораторий современным оборудованием для
ИФА
|
