|
Тест-система для обнаружения и дифференцирования европейского и американского штаммов вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней методом ПЦР в реальном времени
| Описание |
С помощью данной тест-системы вирус репродуктивно-респираторного синдрома
свиней (РРСС) может быть обнаружен в патматериале от больных (кровь, сыворотка, сперма, носовые и конъюнктивальные смывы)
и павших (органы) животных, а также в инфицированных культурах клеток.
Тест-система позволяет определять вирус в концентрации 10-100 ИД50/мл.
Анализ по определению вируса РРСС американского и европейского генотипов включает выделение суммарной РНК, проведение реакции обратной транскрипции и амплификации (ОТ-ПЦР) специфического фрагмента методом ПЦР в реальном времени.
Тест-система состоит из следующих наборов:
- набор для выделения РНК (набор 1)
- набор для выявления РНК вируса РРСС методом ПЦР в реальном времени (набор 2)
Тест-система рассчитана на проведение 50 анализов.
Время проведения анализа от 4 до 5 часов.
|
| Принцип действия тест-системы |
Особенность полимеразной цепной реакции в реальном времени – возможность регистрации результата ПЦР в процессе реакции, в каждый момент времени.
Для ПЦР используются одну пару универсальных праймеров, общих для американского и европейского типа вирусов. После проведения ПЦР в реальном времени получаем фрагменты 105 п. н. (для европейского штамма вируса РРСС) и 96 п. н. (для американского штамма вируса РРСС). Дифференциация проводится с помощью молекулярных зондов (коротких одноцепочечных фрагментов ДНК размером 21 и 27 нуклеотидов, синтезированные химическим путем), комплементарных внутренним участкам - фрагментам РНК вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней (американскому и европейскому штаммам). Зонды имеют различные флуоресцентные красители на 5’ концах праймеров. В ходе ПЦР происходит разрушение зонда, освобождение флуоресцентной метки, что приводит к появлению свечения. Регистрируя интенсивность свечения, можно узнать о ходе реакции без дополнительной стадии – электрофореза.
Существенным преимуществом является то, что регистрация флуоресценции происходит в закрытой пробирке, т.е. полностью исключается контаминация продуктами ПЦР.
Тест-система выявляет вирусы РРСС двух генотипов, а также дифференцирует вирус РРСС от других родственных вирусов.
|
| Условия хранения |
Набор 2 хранят при температуре от минус 18 до минус 20оС, набор 1 – от 2 до 6оС.
|
| Срок годности |
| 12 месяцев |
|
|
