|
ПРОДУКЦИЯ КОМПАНИИ/REAL-TIME PCR
Полимеразная цепная реакция в реальном времени (Real-Time PCR)-
современный, быстрый, качественный метод генодиагностики
 Особенность
полимеразной цепной реакции в реальном времени - определение накопления
продуктов амплификации непосредственно во время проведения реакции.
Для выявления продуктов амплификации в режиме реального времени
используют ДНК-зонды (Рис.1.). В состав ДНК-зонда входит флуоресцентная
метка и гаситель флуоресценции. В ходе ПЦР происходит разъединение
флуоресцентной метки и гасителя, что приводит к появлению свечения.
Рисунок 1. Схема проведения ПЦР в реальном времени.
Для постановки
ПЦР в реальном времени необходим специальный амплификатор (Рис.
2), отличительной особенностью которого является возможность
детектировать флуоресценцию.
 |
Рисунок 2. Прибор ABI
Prism 7000 (Applied Biosystems) для выполнения анализов
методом полимеразной цепной реакции в реальном времени. |
Интенсивность
флуоресценции измеряется, и результат реакции выносится на экран
монитора в виде графика зависимости флуоресценции от количества
циклов в реакции. Таким образом, за ходом реакции можно следить
уже через несколько минут после её начала (Рис.3).
 |
Рисунок
3. Количественное выявление вируса классической
чумы свиней в разведениях. Линии выше черной горизонтальной
полосы [1,2,3,4,5] соответствуют положительным результатам;
ниже [6] - отрицательным. |
Преимущества
ПЦР в реальном времени
- Существенное повышение специфичности метода за счет
наличия внутреннего зонда;
- Возможность количественного определения;
- Надежность из-за снижения риска контаминации (за
счет проведения всех стадий ПЦР в одной пробирке и отсутствия
стадии электрофореза);
- Возможность создания мультиплексных систем, позволяющих
детектировать несколько возбудителей в одном образце;
- Снижение времени проведения реакции;
Наши услуги:
В настоящее время в НПО «НАРВАК» выполняется анализ методом
полимеразной цепной реакции в реальном времени по обнаружению:
- вируса классической чумы свиней;
- вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней;
- цирковируса свиней II типа;
- микобактерий туберкулезного комплекса (M.bovis и M.tuberculosis).
В скором
времени планируется создание и использование тест-систем на основе
полимеразной цепной реакции в реальном времени для диагностики:
- лептоспиоза;
- чумы плотоядных;
- вирусной диареи крупного рогатого скота;
- трансмиссивного гостроэнтерита свиней;
- гриппа А подтипов Н5 и Н7.
|
|
